Описание

3 Дерматофитозы мелких домашних животных якутии

Примечание: числитель – количество собак, знаменатель – количество кошек.

2.5.2. Эффективность антимикотиков in Vitro

Методом бумажных дисков на пластинчатом агаре Сабуро in Vitro в сравнительном аспекте нами была изучена фунгицидная активность бакмикосепта, малавита, микосала, нитрофунгина, фунгина и мази, приготовленной по прописи Н.А. Барсукова.

Опыты проводили в 3 серии: внесение дисков в чашки Петри с 3-х дневной чистой культурой M. canis и T. mentagrophytes; одновременный посев тест-культуры гриба и внесение препарата (раскладка дисков); посев патологического материала от больных животных с предварительным положительным клиническим и микологическим диагнозом на дерматофитоз.

В качестве контрольных тестов использовали музейные штаммы ВИЭВ M. canis № 473 и T. mentagrophytes № 210. Каждым штаммом грибов засевали по 3 чашки Петри с агаром Сабуро. Посевы помещали в термостат при температуре 27°С и ежедневно регистрировали результаты опытов.

Полученные данные показали, что наибольшую фунгицидную активность проявили препараты бакмикосепт, малавит, микосал и нитрофунгин. Максимальная зона задержки роста эпизоотических изолятов M. canis при этом составляла, соответственно, 24-24-21-18 мм.

Аналогичные результаты были получены при изучении чувствительности культур T. mentagrophytes и эталонных штаммов.

2.5.3. Испытание бакмикосепта, микосала и нитрофунгина в экспериментальных условиях при микроспории кошек

Учитывая высокую фунгицидную активность исследуемых препаратов, установленную in Vitro, мы провели их апробацию в эксперименте при лечении котят, больных микроспорией.

С этой целью по принципу аналогов были использованы 3 опытные и 1 контрольная (клинически здоровые) группы котят 3-месячного возраста по 6 особей с классической формой микроспории, подтвержденной микологическим исследованием.

Первую, вторую и третью группы животных лечили, соответственно, бакмикосептом, микосалом и нитрофунгином. Обработку пораженных участков и окружающей здоровой кожи особей 1-й и 2-й группы проводили 1 раз в день в течение 3-х дней подряд согласно наставлению по применению препаратов. Нитрофунгин - согласно инструкции по медицинскому применению препарата, 2 раза в сутки в течение 10-12 суток.

Микологическое исследование проб патологического материала осуществляли первый раз через 5 дней после последней обработки препаратами, а затем еще трижды с интервалом 7 суток.

Гематологические исследования были проведены на 15-30-60 сутки с начала терапии.

В динамике клинического выздоровления уже на 3-и сутки лечения у животных отмечали затухание, на 5-6 – исчезновение воспалительной реакции в очагах поражения, отпадение корочек и чешуек, а на 9-10 сутки – рост новых волос.

При микроскопическом исследовании соскобов кожи и волосяного покрова с периферии обработанных очагов дерматофиты не обнаруживаются уже на 5-е сутки после последней обработки и при 3-х последующих контрольных высевах.

Следует отметить, что наряду с заживлением первичных кожных очагов у 2-х котят первой группы, соответственно, на 4 и 9 сутки, у 1 котенка из 2-ой группы на 5-е сутки и 2-х особей из 3-ей группы на 7-е сутки с начала лечения появились новые единичные очаги в разных местах кожи туловища, которые были обработаны соответствующими препаратами.

Гематологические показатели крови здоровых и больных микроспорией котят достоверно отличались по большинству исследованных параметров, а в процессе лечения прослеживается тенденция к их нормализации. Так, до начала лечения у больных животных отмечается ускорение скорости оседания эритроцитов и изменение других гематологических показателей, что характерно для интенсивного воспалительного процесса (СОЭ 6,0±1,6 за 30 мин и 13,2±2,2 за 1 час, эритроциты, 106 мкл - 3,4±0,70, гемоглобин, г/л – 86,14±0,81, лимфоциты, % – 27,6±1,3, альбумины, % – 54,41±0,17, -глобулины – 7,02±0,14).

В частности, в результате терапии бакмикосептом данные СОЭ, признаки анемии, показатели уровня иммуноглобулинов в процессе выздоровления постепенно нормализовались к концу срока наблюдения (на 60 сутки после начала лечения) – СОЭ за 30 мин – 0,4±0,2***, эритроциты, 106 – 4,52±0,34*, гемоглобин, г/л – 98,76±0,18**, лимфоциты, % – 30,4±0,17**, альбумины, % – 58,70±0,8**, -глобулины – 9,74±0,2**.

Таким образом, полученные экспериментальные данные свидетельствовали о высокой терапевтической эффективности бакмикосепта и микосала при микроспории кошек, что дало нам основание для их апробации в условиях ветеринарной клиники.

2.5.4. Испытание бакмикосепта, микосала и вакцины миколам ТМ при лечении собак, больных дерматофитозом

Было использовано 3 группы больных собак с положительным микроскопическим и культуральным диагнозом на дерматофитозы в количестве 74 животных разного возраста домашнего содержания. Особей 1-й и 2-й группы по 28-26 животных, соответственно, обрабатывали бакмикосептом и микосалом, а 20 собак третьей группы иммунизировали вакциной миколам ТМ, подкожно в дозе 1 мл 2-3-кратно согласно наставления.

Опытных животных подвергали периодическому клиническому осмотру, регистрировали динамику заживления патологического процесса, проявление скрытых дерматофитозных очагов, дополнительно проводили выборочные микологические и гематологические исследования.

Из результатов опыта следует, что у больных животных без обострения клинических признаков дерматофитоза в течение 8-10 (9,06±0,19) суток с начала обработки первичных кожных очагов поражения отмечается их заживление и рост новых волос, однако у некоторых собак в разные сроки возникает обострение клинического процесса. В частности, у 14 больных собак 1-й группы отмечено возникновение вторичных дерматофитозных поражений кожного покрова, в том числе: у 7-ми – на 10, 3-х – на 12 и у 4-х – на 16 сутки. Все пораженные участки были обработаны бакмикосептом по ранее описанной методике. Заживление вторичных очагов происходило в течение 6-8 суток.

В группе собак, обработанных микосалом, вторичные очаги появились у 12 особей, из них у 5-ти животных на 6 сутки, у 4-х – на 12 и у 3-х – на 17 сутки после начала терапии первичных дерматофитозных очагов поражения.

У собак, привитых вакциной миколам ТМ, вторичные дерматофитозные поражения были обнаружены: у пяти особей на 4 сутки после первой инъекции вакцины и у трех животных на 8 сутки после второй. Этим собакам вакцина миколам ТМ была введена в 3-й раз через 10-14 дней, а очаги поражения подвергнуты местной обработке бакмикосептом. Заживление всех вторичных дерматофитозных очагов происходило в течение 6-8 суток после дополнительной местной обработки.

Результаты контрольного микологического исследования проб патологического материала, взятых с мест локализации первичных и вторичных кожных поражений, на 30 и 90 сутки после повторной местной обработки были отрицательными.

Данные изучения гематологических показателей больных дерматофитозом собак свидетельствуют о наличии у них выраженного воспалительного процесса, с признаками анемии, лимфоцитопении, снижения иммунологического статуса: СОЭ за 30 мин –5,6±0,6; эритроциты, 106 мкл – 5,16±0,18; лейкоциты – 7,30±0,44; гемоглобин, г/л – 96,46±0,18; эозинофилы – 2,46±0,62; нейтрофилы – 4,14±0,26; лимфоциты, % – 13,42±1,06; -глобулины – 7,18±0,26 (n=6).

В процессе терапии антимикотическими препаратами и вакциной миколам ТМ отмечается тенденция к нормализации параметров СОЭ, лимфоцитов, общего белка и иммуноглобулинов: СОЭ за 30 мин – 0,8±0,6***; эритроциты, 106 мкл – 6,16±0,5*; лейкоциты – 8,14±0,46**; гемоглобин, г/л – 109,74±0,20***; лимфоциты, % – 22,12±0,8***; -глобулины – 8,42±0,14* (бакмикосепт на 60 сутки).

Возникновение вторичных дерматофитозных очагов как при местной терапии антимикотиками, так и при вакцинации, послужили основанием для апробации исследуемых препаратов и вакцины миколам ТМ в качестве средств комплексной терапии больных дерматофитозов мелких домашних животных.

2.5.5. Терапевтическая эффективность комплексной терапии при дерматофитозах собак и кошек

2.5.5.1. Эффективность использования бакмикосепта и

вакцины миколам ТМ

Вакцину миколам ТМ и бакмикосепт применили для лечения 81 собаки и 37 кошек с дерматитами, обусловленными M. canis, стрептококками, стафилококками и сапрофитами.

Анализ полученных данных показал, что комплексная терапия обеспечивает клиническое выздоровление собак и кошек без обострения клинических признаков дерматофитозов соответственно на 7-9 (7,86±0,27) и 9-11 (9,0±0,28) сутки.

У собак и кошек с обострением клинических признаков дерматофитоза заживление вторичных кожных очагов происходит на 7-8 сутки после 2-ой инъекции вакцины миколам ТМ.

Выборочное изучение динамики показателей крови собак, больных разными формами дерматофитозов при комплексной терапии бакмикосептом и вакциной миколам ТМ свидетельствует о начале выраженной нормализации гематологических параметров уже на 15 сутки с начала лечения. На 60 сутки закономерной является нормализация СОЭ, наблюдается достоверный рост числа эритроцитов, гемоглобина, лейкоцитов, общего белка, стабилизация уровня глобулиновых фракций: СОЭ за 30 мин – 0,4±0,1***; гемоглобин, г/л – 109,04±0,36**; эритроциты 106 мкл – 6,1±0,32*; лейкоциты (103 мкл) – 8,7±0,42**; лимфоциты, % – 25,3±0,16***; -глобулины – 9,33±0,96**.

Контрольные микологические исследования 15 собак и 14 кошек, проведенные через 3 месяца после клинического выздоровления животных были отрицательными.

2.5.5.2. Эффективность применения микосала и вакцины

Вакцину миколам ТМ и микосал использовали для лечения 82 собак и 67 кошек с поражениями кожи различной этиологии.

Результаты исследования показали, что комплексное лечение способствует заживлению кожных очагов поражения различной этиологии в сроки аналогичные применению бакмикосепта.

Отрицательные результаты получены при контрольном микологическом исследовании проб патологического материала от 6 собак и 6 кошек через 3 месяца после окончания курса лечения.

Результаты выборочного исследования крови больных дерматофитозом животных, проведенные через 15-30 и 60 суток после начала курса лечения свидетельствовали о достоверной нормализации гематологических и иммунологических показателей в процессе терапии и в целом соответствовали данным использования бакмикосепта и вакцины миколам ТМ.

2.5.5.3. Результаты применения малавита, нитрофунгина и вакцины миколам ТМ

На заключительном этапе исследования, учитывая целесообразность апробации альтернативных экологически-безопасных антимикотиков, мы применили препараты, используемые в гуманной медицине. С этой целью определили эффективность комплексного применения малавита, нитрофунгина и вакцины миколам ТМ в системе противодерматофитозных мероприятий.

Малавит и вакцину миколам ТМ применили для лечения 71 собаки и 44 кошек с дерматитами различной этиологии.

Анализ полученных результатов свидетельствует о высокой терапевтической эффективности и целесообразности использования малавита в ветеринарной практике. Первичные и вторичные очаги поражений грибной и бактериальной этиологии заживают в течении 5-6 суток с начала их первичной обработки и первой инъекции вакцины миколам ТМ у 56 собак и 38 кошек. При глубокой форме дерматофитозов заживление отмечается на 9-10 день.

Нитрофунгин и вакцину миколам ТМ использовали при лечении 68 собак и 33 кошек. Обработку очагов поражения, клинические, микологические и гематологические исследования проводили по вышеописанной методике описанной в пункте 2.5.3.

Заживление кожных очагов зависело от их этиологии, степени поражения и происходило на 9-10 сутки с начала терапии. Нормализация гематологических показателей отмечалась на 60 сутки терапии.

Таким образом, сравнительные результаты лечения больных дерматофитозом мелких домашних животных с применением вакцины миколам ТМ, бакмикосепта, малавита, микосала и нитрофунгина позволяют заключить о высокой терапевтической эффективности комплексного использования указанных препаратов.

1. В Республике Саха (Якутия) впервые изучены распространение и особенности эпизоотологии дерматофитозов мелких домашних животных. Болезнь регистрируются среди собак домашнего и уличного содержания, кошек, белых крыс и морских свинок. Показатель инфицированности по результатам микологической диагностики составил 11,41, 33,68, 16,66 и 28,57%, соответственно, из числа обследованных животных. В специфических условиях региона дерматофитозы диагностируются во все периоды года, наиболее часто болеют беспородные собаки и кошки, среди которых широко распространено миконосительство.

2. Установлено, что на территории Якутии возбудителями дерматофитозов мелких домашних животных являются грибы M. canis, M. gypseum и T. mentagrophytes. Распространенность M. canis у больных собак составляет 10,49%, миконосителей - 16,66%, у больных кошек 27,74%, миконосителей – 27,08%; M. gypseum у больных собак – 0,13%; T. mentagrophytes у больных собак – 0,27%, кошек – 1,39%. Этиологическую структуру оппортунистических грибов составляют: Mallassezia pachydermatis, Candidas albicans и Aspergillus fumiqatus, Alternaria, Trichoderma и Mucor.

3. Частота встречаемости оппортунистических грибов в пробах патологического материала от больных собак и кошек составляет 31,12% и 25,22%, от миконосителей – 18,75% и 11,45% соответственно. Бактериальная флора очагов поражения представлена стрептококками и стафилококками: при первой инфекции у больных собак и кошек - 31,76% и 16,75% у миконосителей - 4,16% и 7,29%; при второй - 14,36% и 11,69%, 8,33% и 4,16% соответственно. Ассоциация грибов и бактерий составляет: у больных собак - 10,49% и 12,50% - у миконосителей ; у кошек - 14,48% и 7,29% соответственно.

4. Кератинолитическая активность грибов M. canis, M. gypseum и T. mentagrophytes выделенных от больных собак и кошек проявляется в 100% случаев, а у миконосителей M. canis,– 100% и 69,2% соответственно. Все исследованные грибы оппортунисты, выделенные из очагов поражения на коже, клинически выраженные как дерматофитоз, также проявляют кератинолитическую активность.

5. Изолированные от больных мелких домашних животных дерматофиты M. canis, M. gypseum и T. mentagrophytes обладают характерными для видов культурально-морфологическими, вегетативно-репродуктивными свойствами и значительной устойчивостью к воздействию неблагоприятных факторов внешней среды. В весенне-летний период при воздействии прямых солнечных лучей дерматофиты остаются жизнеспособными в течение 35 суток, внутри конуры - 90 суток. В осенне-зимний период выживаемость дерматофитов составляет 180 суток, чистые культуры дерматофитов на питательных средах при хранении в холодильнике без пересевов остаются жизнеспособными 240 суток.

6. Дерматофитозный процесс характеризуется разнообразием форм 2клинического проявления и течения, наличием признаков выраженного воспалительного процесса, количественными и качественными изменениями иммунно-морфологических показателей крови больных собак в пределах: СОЭ за 30 мин – 5,6±0,6, эритроциты, 106 мкл – 5,16±0,18, лейкоциты – 7,30±0,44, гемоглобин, г/л – 96,46±0,18, эозинофилы – 2,46±0,62, нейтрофилы – 4,14±0,26, лимфоциты, % – 13,42±1,06, -глобулины – 7,18±0,26 (n=6).

7. Установлена высокая терапевтическая эффективность при дерматофитозах мелких домашних комплексного использования вакцины миколам ТМ и исследованных антимикотиков. Заживление кожных очагов поражения наблюдается в 100% случаев и сопровождается нормализацией иммунно-морфологических параметров крови.

8. Предложенная нами схема диагностических и лечебно- профилактических мероприятий при грибковых болезнях собак и кошек значительно сокращает сроки выявления и терапии больных животных и тем самым позволяет повысить уровень противодерматофитозных мероприятий в условиях Якутии.

Материалы научных исследований включены в методические указания:

- «Дерматофитозы мелких домашних животных», одобренные методическим советом ФВМ ЯГСХА (протокол № 3 от 28 декабря 2005 г.) и утвержденные Управлением ветеринарии МСХ РС (Я) (протокол № 4 от 27 июля 2006 г.);

- «Выявление дерматофитозов среди мелких домашних животных методами «провокации» и цифровой фотографии», утверждены методической комиссией ФВМ ЯГСХА (протокол № 3 от 31 марта 2011 г.).

Материалы работы используются в учебном процессе при подготовке ветеринарных специалистов на кафедре паразитологии и эпизоотологии факультета ветеринарной медицины Якутской государственной сельскохозяйственной академии и при чтении лекционных курсов в институте повышения квалификации специалистов АПК РС (Я) при ЯГСХА.

5. СПИСОК ОПУБЛИКОВАННЫХ РАБОТ

Статья в журнале из списка, рекомендованного ВАК Минобразования и науки РФ

1. Бутковский, В.Ф. Дерматомикозы собак и кошек в Якутии / В.Ф. Бутковский, Ю.Ю. Устинцева // Ветеринария. – 2008. – № 12. – С. 49-52.
2. Устинцева, Ю.Ю. Выживаемость возбудителей дерматомикозов мелких домашних животных в Якутии / Ю.Ю. Устинцева, В.Ф. Бутковский // Российский ветеринарный журнал. Мелкие домашние и дикие животные.- 2011.- №1.- С. 4-5